四環(huán)素是一類水體中常見(jiàn)的廣譜抗生素 ,它能與核蛋白體的30S 亞單位結(jié)合,阻止氨酰基tRNA 同核蛋白體結(jié)合,抑制蛋白質(zhì)的合成。同時(shí),四環(huán)素類藥物的廣泛使用引起了四環(huán)素耐藥特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、鞭毛、菌毛在環(huán)境中產(chǎn)生并快速傳播。至今,被發(fā)現(xiàn)的四環(huán)素耐藥細(xì)菌有115 屬、530 種。不同來(lái)源廢水中四環(huán)素的含量差異較大,一般含量在幾十ng?L - 1 到幾百μg?L - 1 之間。近年來(lái),四環(huán)素對(duì)污水處理系統(tǒng)的影響引起了廣泛關(guān)注。CETECIOGLU 等 在SBR 中通過(guò)測(cè)定COD 的含量和氣體的產(chǎn)量的變化發(fā)現(xiàn),當(dāng)四環(huán)素投加量低于
8. 5 mg?L - 1 時(shí),反應(yīng)器內(nèi)底物降解作用不受影響,但產(chǎn)氣量減小了10% ~ 20% ,說(shuō)明四環(huán)素對(duì)系統(tǒng)中微生物造成了影響。AYDIN 等在ASBR中通過(guò)測(cè)定甲烷產(chǎn)量和揮發(fā)性脂肪酸的積累量的變化發(fā)現(xiàn),不同濃度組合的四環(huán)素、紅霉素和磺胺對(duì)同型乙酸菌和產(chǎn)甲烷菌產(chǎn)生了不同程度的影響。AYDIN 等 在隨后的研究中又分別運(yùn)用了real-time PCR 和PCR-DGGE 分子生物學(xué)技術(shù)發(fā)現(xiàn),四環(huán)素、紅霉素、磺胺3 種抗生素共同影響下產(chǎn)乙酸特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、鞭毛、菌毛和產(chǎn)甲烷古菌存在互營(yíng)關(guān)系且這種互營(yíng)關(guān)系對(duì)反應(yīng)器的穩(wěn)定運(yùn)行起關(guān)鍵作用。
隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,高通量測(cè)序技術(shù)已被廣泛使用在研究土壤、海洋、污水、活性污泥的群落結(jié)構(gòu)中。第2 代Illumina MiSeq 高通量測(cè)序能克服傳統(tǒng)檢測(cè)方法的缺陷,具有通量高、錯(cuò)誤率低、成本低、流程自動(dòng)化、速度快等優(yōu)勢(shì) ,目前已在研究微生物多樣性群落結(jié)構(gòu)方面受到廣泛認(rèn)可 ;因此,將Illumina MiSeq 高通量測(cè)序方法應(yīng)用于污水處理系統(tǒng)的研究,對(duì)深入認(rèn)識(shí)污水處理系統(tǒng)具有實(shí)際意義。
當(dāng)前,污水厭氧處理因其高效能、低能耗等特點(diǎn)在污水處理工程上開始受到關(guān)注。它實(shí)際上是借助于不同微生物種群間的協(xié)同作用,通過(guò)水解―酸化―產(chǎn)甲烷等一系列生物反應(yīng)將有機(jī)底物轉(zhuǎn)化為甲烷和無(wú)機(jī)物的過(guò)程。在這個(gè)過(guò)程中,微生物群落構(gòu)成直接影響到污水處理的效果,因此,深入認(rèn)識(shí)污水厭氧消化系統(tǒng)(system)的微生物群落構(gòu)成,對(duì)厭氧污水處理系統(tǒng)的穩(wěn)定運(yùn)行具有指導(dǎo)作用。
基于此,本研究通過(guò)室內(nèi)模擬實(shí)驗(yàn),選擇(xuanze)ABR 多相厭氧反應(yīng)器進(jìn)行連續(xù)（Continuity)流實(shí)驗(yàn),啟動(dòng)反應(yīng)器達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)后,分別在不含四環(huán)素和含有250 μg?L - 1 四環(huán)素的人工配制污水條件下運(yùn)行90 d,通過(guò)考察來(lái)自反應(yīng)器的氫氣、甲烷產(chǎn)生量的變化,運(yùn)用Illumina MiSeq 高通量測(cè)序方法對(duì)反應(yīng)器中的微生物群落構(gòu)成進(jìn)行分析(Analyse),研究四環(huán)素對(duì)污水厭氧處理系統(tǒng)微生物群落造成的影響,以期從微生物關(guān)系角度（angle)深入了解這種影響,為污水厭氧處理技術(shù)研究及工程實(shí)踐提供參考。
1 材料和方法
1. 1 實(shí)驗(yàn)裝置
ABR 采用厚為5 mm 的有機(jī)玻璃板加工制成,尺寸為455 mm × 150 mm × 400 mm,有效容積為21L,置于℃ 的恒溫箱中。反應(yīng)器分為3 個(gè)格室,按照前后順序分為格室1、格室2、格室3,分別命名為C1、C2、C3,每個(gè)格室由上、下流室 組成, 折流板底角為45°。格室體積比V1 ∶ V2 ∶ V3 =
1. 5 ∶ 1 ∶ 1。每個(gè)格室上部設(shè)有集氣口,側(cè)部分別設(shè)有取水口、取泥口,實(shí)驗(yàn)裝置見(jiàn)圖1。
1. 2 接種污泥
接種污泥取自廣州市瀝窖污水處理廠A2 / O 工藝的厭氧池。污泥MLSS =
2
4. 67 g?L - 1 ,MLVSS/MLSS = 0. 61,pH =
6. 58,含水率為9
7. 30% 。接種污泥體積為反應(yīng)器有效容積的1 /3。
1. 3 實(shí)驗(yàn)用水
配水以葡萄糖為碳源,NH4 Cl 和KH2 PO4 分別為氮源和磷源,同時(shí)加入C
A、M
G、F
E、C
O、Ni 等微量元素,以保證微生物細(xì)胞合成的需要。此外,向配水中投加一定量的NaHCO3 以保證ABR 內(nèi)的緩沖能力。
反應(yīng)器以連續(xù)流方式進(jìn)水,水力停留時(shí)間為24 h。在啟動(dòng)階段,采用逐步增加進(jìn)水負(fù)荷的啟動(dòng)方式,進(jìn)水COD 濃度為500 ~ 2 000 mg?L - 1 ,當(dāng)COD 去除率穩(wěn)定在80% 以上、出水各項(xiàng)指標(biāo)趨于正常,啟動(dòng)階段完成。反應(yīng)器的運(yùn)行先后經(jīng)歷了啟動(dòng)階段、穩(wěn)定運(yùn)行階段、添加四環(huán)素運(yùn)行階段。
1. 4 DNA 的提取和PCR 擴(kuò)增及其微生物多樣性數(shù)據(jù)分析
分別在反應(yīng)器的穩(wěn)定運(yùn)行階段和添加四環(huán)素運(yùn)行階段每間隔18 d 從每個(gè)格室采集一次活性污泥樣本,分別命名為Ctrl D18C1、Ctrl D36C1、Ctrl D54C1、Ctrl D72C1、Ctrl D90C1、Tre D18C1、Tre D36C1、TreD54C1、Tre D72C1、Tre D90C1,其中“Ctrl”代表未添加四環(huán)素運(yùn)行時(shí)的污泥樣本,“Tre”代表添加四環(huán)素運(yùn)行時(shí)的污泥樣本,“D18”代表第18 天取樣,“C1”代表樣本取自格室1,格室2 和格室3 的樣本命名為C2和C3。實(shí)驗(yàn)共從3 個(gè)格室中共采集到30 個(gè)活性污泥樣本。分別稱取0. 4 g 污泥用于DNA 提取。采用MOBIO PowerSoil DNA Isolation Kit DNA 提取試劑盒進(jìn)行DNA 提取,提取步驟依據(jù)(yī jù)說(shuō)明書操作,提取好的DNA 保存于- 20 ℃ 冰箱。
以提取的基因組DNA 作為模板,使用16S rRNA 基因V4 區(qū)特異性引物F515 和R806 進(jìn)行PCR 擴(kuò)增,擴(kuò)增片段長(zhǎng)度約為300 bp。本實(shí)驗(yàn)采用50 μL 的PCR 反應(yīng)體系:1 μL 模板,各1 μL 的10 μmol?L - 1正向引物和反向引物,0. 2 μL 20 mg?mL - 1 的蛋白質(zhì),25 μL 的GOOGLE PRemix Ex Taq Version,
2
1. 8 μL 滅菌水。PCR 的反應(yīng)條件:94 ℃ 5 min;94 ℃30 s,52 ℃ 30 s,72 ℃ 45 s,31 個(gè)循環(huán);72 ℃ 10 min。將各樣品的PCR 產(chǎn)物按照等摩爾量進(jìn)行混合,使用QIAquick Gel Extraction Kit 凝膠回收試劑盒切膠回收PCR 混合產(chǎn)物,并用1% 的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),最后使用Illumina MiSeq 高通量測(cè)序平臺(tái)進(jìn)行基因測(cè)序。
測(cè)序結(jié)束后,首先,使用Trimmomatic 軟件去掉序列3′端連續(xù)的低質(zhì)量堿基。接著,用Mothur 中的“make. contigs”命令將兩端reads 拼接成完整的目的DNA 片段,再用“screen. seqs”,“trim. seqs” 命令進(jìn)行錯(cuò)誤序列的識(shí)別和修剪。最后,使用QIIME 軟件對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行微生物的多樣性分析,將得到的序列進(jìn)行聚類,將97% 相似性的序列聚類成為OTUs 。物種分類由UCLUST 軟件 和Greengenes OTU 數(shù)據(jù)庫(kù) 實(shí)現(xiàn)。
1. 5 反應(yīng)器氣體產(chǎn)生的分析
于固定時(shí)間每6 d 測(cè)定一次格室內(nèi)產(chǎn)生氣體中氫氣和甲烷的含量,檢測(cè)方法為氣相色譜法。使用儀器為安捷倫7820A 氣相色譜儀,檢測(cè)器為TCD,色譜柱為TDX-01,色譜條件如下:進(jìn)樣口、色譜柱、檢測(cè)器的溫度分別為100、100 和200 ℃ ;載氣為氮?dú)?流量為35 mL?min - 1 ;進(jìn)樣量為1 mL。
2 結(jié)果和分析
2. 1 四環(huán)素對(duì)反應(yīng)器內(nèi)氣體產(chǎn)生的影響
ABR 3 個(gè)格室中氫氣的產(chǎn)生情況如圖2 所示。僅在格室1 中檢測(cè)到氫氣的存在,而格室2 和格室3中沒(méi)有檢測(cè)到氫氣的產(chǎn)生,這主要是由于格室1 進(jìn)行的是產(chǎn)氫產(chǎn)乙酸反應(yīng),而后端格室主要進(jìn)行的是產(chǎn)甲烷反應(yīng)。未添加四環(huán)素運(yùn)行時(shí),格室1 內(nèi)氫氣的平均產(chǎn)量為0. 010 2 L? - 1 。添加四環(huán)素后,氫氣產(chǎn)量是未添加四環(huán)素時(shí)氫氣產(chǎn)量平均值的
4. 05 ~
6. 89 倍。說(shuō)明四環(huán)素的添加能使氫氣產(chǎn)量增加。
ABR 3 個(gè)格室甲烷產(chǎn)生情況,如圖3 所示。在未添加四環(huán)素時(shí),格室1、格室2、格室3 的甲烷平均產(chǎn)量分別為0. 320
4、0. 146
2、0. 088 1 L? - 1。顯然,甲烷產(chǎn)量在縱向上呈降低的趨勢(shì)。這與反應(yīng)器內(nèi)的底物分配有關(guān),格室1 進(jìn)水有機(jī)物含量較高,隨著格室內(nèi)微生物的降解作用,有機(jī)物含量在縱向上隨著格室逐漸降低,有機(jī)物的減少使得甲烷產(chǎn)量在格室間縱向減小。添加四環(huán)素后,格室1、格室2、格室3 的甲烷產(chǎn)量隨著運(yùn)行時(shí)間的推移呈現(xiàn)不同程度的下降,分別是未添加四環(huán)素時(shí)對(duì)應(yīng)甲烷平均產(chǎn)量的4
3. 90% ~ 80. 20% 、
2
7. 18%~ 7
9. 79% 、3
8. 24% ~ 8
3. 70% 。通過(guò)對(duì)比四環(huán)素添加后同一個(gè)格室不同時(shí)間的甲烷產(chǎn)量變化,發(fā)現(xiàn)甲烷產(chǎn)量隨著運(yùn)行時(shí)間的推移呈現(xiàn)下降趨勢(shì)（trend),說(shuō)明四環(huán)素對(duì)產(chǎn)甲烷的抑制作用隨著時(shí)間的推移增大。
2. 2 微生物(Micro-Organism)豐度分析
通過(guò)反應(yīng)器中獲取的DNA 序列與GreengenesOTU 數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì),得出反應(yīng)器中微生物主要有16 個(gè)屬,如圖4 所示。分別為甲烷桿菌屬、密螺旋體屬、寡養(yǎng)單胞菌屬、不動(dòng)桿菌屬、脫硫弧菌屬、長(zhǎng)繩菌屬、叢毛單胞菌屬、互營(yíng)桿菌屬、梭菌屬、浮霉?fàn)罹鷮佟lvii28、Paludibacte
R、AUTHM297、WCHB1-05、A17、W22。
由圖4 可知,隨著四環(huán)素的添加,不同物種呈現(xiàn)出不同的變化趨勢(shì)。其中,隨著四環(huán)素的添加,密螺旋體屬、脫硫弧菌屬、互營(yíng)桿菌屬、W22 的豐度在3 個(gè)格室內(nèi)均呈現(xiàn)增長(zhǎng)的趨勢(shì),說(shuō)明密螺旋體屬、互營(yíng)桿菌屬、脫硫弧菌屬、W22 對(duì)四環(huán)素具有一定耐藥性。
密螺旋體屬能利用氫氣和二氧化碳(C)轉(zhuǎn)化成乙酸。膜生物反應(yīng)器膜分離技術(shù)與生物處理技術(shù)有機(jī)結(jié)合之新型態(tài)廢水處理系統(tǒng)。以膜組件取代傳統(tǒng)生物處理技術(shù)末端二沉池，在生物反應(yīng)器中保持高活性污泥濃度，提高生物處理有機(jī)負(fù)荷，從而減少污水處理設(shè)施占地面積，并通過(guò)保持低污泥負(fù)荷減少剩余污泥量。主要利用沉浸于好氧生物池內(nèi)之膜分離設(shè)備截留槽內(nèi)的活性污泥與大分子有機(jī)物。膜生物反應(yīng)器系統(tǒng)內(nèi)活性污泥（MLSS）濃度可提升至8000~10,000mg/L，甚至更高；污泥齡(SRT)可延長(zhǎng)至30天以上。添加四環(huán)素后,如表1 所示,格室1、格室2、格室3 內(nèi)的密螺旋體屬分別是未添加四環(huán)素時(shí)相應(yīng)密螺旋體屬平均豐度的
1. 09 ~
2. 00 倍、
1. 27 ~
1. 79 倍、
1. 41 ~
6. 52 倍,密螺旋體屬豐度的增加說(shuō)明四環(huán)素的添加能促進(jìn)氫氣和二氧化碳轉(zhuǎn)化成乙酸的過(guò)程,有利于乙酸的積累。有研究表明,乙酸是微生物燃料電池生產(chǎn)電能的首選底物,1 t 生物質(zhì)可產(chǎn)出價(jià)值150 美元的乙酸,卻只能產(chǎn)出31 美元的甲烷;因此,在處理四環(huán)素污水時(shí),可以充分利用密螺旋體屬的優(yōu)勢(shì),增加乙酸積累,可以通過(guò)耦合系統(tǒng)將乙酸轉(zhuǎn)化為微生物燃料電池能源或作為發(fā)酵工業(yè)的原料,實(shí)現(xiàn)資源回收。
互營(yíng)桿菌屬是一類產(chǎn)氫產(chǎn)乙酸細(xì)菌,能將高級(jí)脂肪酸和醇類氧化分解為乙酸和H2 。
添加四環(huán)素后,如表1 所示,除了格室1 第18 天和格室3 第54 天的互營(yíng)桿菌（fungus)屬比未添加四環(huán)素時(shí)平均豐度低,這可能（maybe)是由于反應(yīng)器運(yùn)行過(guò)程中其他條件擾動(dòng)引起的,其他時(shí)間內(nèi)格室1、格室2、格室3 內(nèi)的互營(yíng)桿菌屬分別是未添加四環(huán)素時(shí)相應(yīng)互營(yíng)桿菌屬平均豐度的
1. 37 ~
2. 04 倍、
1. 00 ~
3. 95 倍、
1. 48 ~
2. 98 倍,互營(yíng)桿菌屬豐度的增加說(shuō)明四環(huán)素的添加有利于產(chǎn)氫過(guò)程,與
2. 1 中氫氣產(chǎn)量增大的結(jié)論相印證。氫氣是一種清潔能源,具有燃燒熱值高、燃燒產(chǎn)物無(wú)污染的特點(diǎn),具有很好的應(yīng)用價(jià)值;因此,在處理四環(huán)素污水時(shí),可以加強(qiáng)氫氣的回收利用,減小污水處理成本。
脫硫弧菌屬是一類硫酸鹽還原菌,它能利用金屬表面的有機(jī)物作為碳源,將硫酸鹽還原成硫化氫,加速金屬管材的腐蝕。添加四環(huán)素后,如表1 所示,格室1、格室2、格室3 內(nèi)的脫硫弧菌屬分別是未添加四環(huán)素時(shí)相應(yīng)脫硫弧菌屬平均豐度的
1. 09 ~
3. 99 倍、
1. 12 ~
3. 59 倍、
1. 20 ~
7. 40 倍,脫硫弧菌屬豐度的增加說(shuō)明四環(huán)素的出現(xiàn)會(huì)加劇污水處理系統(tǒng)中金屬管材的腐蝕;因此,在處理四環(huán)素污水時(shí),應(yīng)充分重視處理系統(tǒng)中金屬管材的防腐措施,減少因脫硫弧菌屬增多而造成的損失。
格室1 內(nèi)的寡養(yǎng)單胞菌（fungus)屬和不動(dòng)桿菌屬、格室3 內(nèi)的梭菌屬和甲烷桿菌屬隨著四環(huán)素的添加,豐度先減小后增加,如表2 所示,在四環(huán)素添加初期,這些微生物物種在相應(yīng)格室內(nèi)受到的抑制作用較大,隨著時(shí)間的推移,所受抑制作用減弱,耐藥性增加,說(shuō)明四環(huán)素的長(zhǎng)期污染能使微生物的耐藥性發(fā)生改變。
表1 豐度隨四環(huán)素添加而增大的物種的豐度變化值
表2 豐度隨四環(huán)素添加先減小后增大的物種的豐度變化值
2. 3 樣本的主坐標(biāo)分析(Analyse) 和聚類分析
主坐標(biāo)分析能展示各個(gè)樣本間的差異大小,2 個(gè)樣本在坐標(biāo)軸上的距離較近,則表示這2 個(gè)樣本的物種組成較相似。膜生物反應(yīng)器膜分離技術(shù)與生物處理技術(shù)有機(jī)結(jié)合之新型態(tài)廢水處理系統(tǒng)。以膜組件取代傳統(tǒng)生物處理技術(shù)末端二沉池，在生物反應(yīng)器中保持高活性污泥濃度，提高生物處理有機(jī)負(fù)荷，從而減少污水處理設(shè)施占地面積，并通過(guò)保持低污泥負(fù)荷減少剩余污泥量。主要利用沉浸于好氧生物池內(nèi)之膜分離設(shè)備截留槽內(nèi)的活性污泥與大分子有機(jī)物。膜生物反應(yīng)器系統(tǒng)內(nèi)活性污泥（MLSS）濃度可提升至8000~10,000mg/L，甚至更高；污泥齡(SRT)可延長(zhǎng)至30天以上。圖5 反映了未添加四環(huán)素時(shí)和添加四環(huán)素后樣本間物種的差異大小。可以看出,主成分1 和主成分2 是造成樣品的2 個(gè)最大差異特征,貢獻(xiàn)率分別為
2
5. 82% 和
11. 86% 。未添加四環(huán)素時(shí),C1、C2、C3 的樣本分別聚在一起,C1 和C2 樣本之間距離較近,且和C3 距離較遠(yuǎn),說(shuō)明未添加四環(huán)素時(shí),C1 和C2 的物種相似性較高,且這2 個(gè)格室的物種和C3 格室物種有一定差異。添加四環(huán)素后,C1 和C3 物種在初期有個(gè)漸變的過(guò)程,后期3 個(gè)格室的樣本聚在一起,且與未添加四環(huán)素時(shí)有一定距離,說(shuō)明四環(huán)素添加前后格室內(nèi)物種有較大差異,且隨著四環(huán)素的添加,3 個(gè)格室間的物種組成相似性提高。
樣品聚類分析圖 進(jìn)一步說(shuō)明PCoA 的結(jié)果,樣品越靠近,枝長(zhǎng)越短,說(shuō)明2 個(gè)樣品的物種組成越相似。由圖6 可以看出,未添加四環(huán)素時(shí),C1 和C2 格室樣品距離較近,枝長(zhǎng)較短,說(shuō)明這2 個(gè)格室間物種相似性較高,而C3 格室的樣品在另一個(gè)分支上,距離較遠(yuǎn),枝長(zhǎng)較長(zhǎng),說(shuō)明C3 格室的物種與C1、C2 格室的物種具有一定的差異。隨著四環(huán)素的添加,C1 和C3 樣本在初期有個(gè)遠(yuǎn)離的過(guò)程,說(shuō)明物種有個(gè)漸變的過(guò)程,在后期3 個(gè)格室的樣本距離縮短,相互間枝長(zhǎng)變短,說(shuō)明在后期3 個(gè)格室物種相似性增大,且添加四環(huán)素后的3 個(gè)格室樣本與未添加四環(huán)素時(shí)的樣本分別位于不同的大分支上,說(shuō)明四環(huán)素的添加使反應(yīng)器內(nèi)微生物(Micro-Organism)產(chǎn)生較大變化。
主坐標(biāo)分析 和樣品聚類分析共同說(shuō)明了四環(huán)素添加前后反應(yīng)器內(nèi)的微生物(Micro-Organism)的物種組成具有較大差異,四環(huán)素添加后,隨著運(yùn)行時(shí)間的推移,格室間微生物的物種組成相似性增大。產(chǎn)生這種現(xiàn)象主要原因是:由于四環(huán)素耐藥物種的存在,使四環(huán)素添加后不具有四環(huán)素耐藥性的物種逐漸被四環(huán)素耐藥物種取代,隨著運(yùn)行時(shí)間的推移,各格室內(nèi)耐藥物種增多,所以格室間物種相似性增大;由于耐藥物種逐漸取代了不耐藥物種,所以四環(huán)素添加前后反應(yīng)器內(nèi)微生物物種組成有較大差異。說(shuō)明長(zhǎng)期受抗生素污染的污水處理系統(tǒng)對(duì)微生物具有選擇性,使微生物群落結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,進(jìn)一步說(shuō)明通過(guò)污泥馴化能減小抗生素對(duì)污水處理系統(tǒng)的不利影響。具體參見(jiàn)污水寶商城資料或
3 結(jié)論
本實(shí)驗(yàn)采用實(shí)驗(yàn)室人工配置污水,對(duì)具有3 個(gè)格室的ABR 進(jìn)行連續(xù)流實(shí)驗(yàn),啟動(dòng)反應(yīng)器達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)后, 分別在無(wú)四環(huán)素配置污水和濃度為250μg?L - 1 的四環(huán)配置污水環(huán)境下運(yùn)行反應(yīng)器90 d,探討2 種條件下氫氣、甲烷產(chǎn)量的變化,并運(yùn)用Illumina MiSeq 高通量測(cè)序方法從微觀上揭示上述變化的原因。膜生物反應(yīng)器在污水處理，水資源再利用領(lǐng)域，MBR又稱膜生物反應(yīng)器（Membrane Bio-Reactor ）,是一種由膜分離單元與生物處理單元相結(jié)合的新型水處理技術(shù)。主要研究結(jié)果如下:1) 四環(huán)素的添加能使氫氣產(chǎn)量增加,四環(huán)素對(duì)產(chǎn)甲烷的抑制作用隨著時(shí)間的推移增大;2)Illumina MiSeq 測(cè)序獲得反應(yīng)器內(nèi)的序列所屬16 個(gè)屬,其中,密螺旋體屬、脫硫弧菌屬、互營(yíng)桿菌屬、W22 對(duì)四環(huán)素具有一定耐藥性;3)格室1 內(nèi)的寡養(yǎng)單胞菌屬和不動(dòng)桿菌屬、格室3 內(nèi)的梭菌屬和甲烷桿菌屬對(duì)四環(huán)素的耐藥性隨著四環(huán)素污染時(shí)間的推移,耐藥性增加,說(shuō)明四環(huán)素長(zhǎng)期的污染能引起微生物的耐藥性發(fā)生改變;在處理(chǔ lǐ)四環(huán)素污水時(shí),可以通過(guò)以下調(diào)控趨利避害:充分利用密螺旋體屬的優(yōu)勢(shì),增加乙酸積累,可以通過(guò)耦合系統(tǒng)將乙酸轉(zhuǎn)化為微生物燃料電池能源或作為發(fā)酵工業(yè)的原料,實(shí)現(xiàn)資源回收,在處理四環(huán)素污水時(shí),可以加強(qiáng)氫氣的回收利用,減小污水處理成本;硫弧菌屬增多會(huì)加劇污水處理系統(tǒng)中金屬管材的腐蝕,因此應(yīng)充分重視處理系統(tǒng)中金屬管材的防腐措施,減少因脫硫弧菌屬增多而造成的損失;4)PCoA 分析和聚類分析結(jié)果表明,四環(huán)素添加前后系統(tǒng)內(nèi)物種組成具有較大差異,四環(huán)素的添加引起了具有四環(huán)素耐藥性物種逐漸取代不具
